在引入和繁殖小鼠的初期阶段,以及在正式实验开始前,基因型鉴定是不可或缺的一步,以确保实验的顺利进行。那么,当您获得尊龙凯时的小鼠后,如何找到合适的基因型鉴定方法和所需的引物序列呢?以用于镰状细胞贫血研究的Berkeley模型(003342)为例,该小鼠品系缺乏鼠源的Hba和Hbb基因,同时引入了人源序列(包括致病突变)。由于这些等位基因和转基因在遗传过程中并不连锁,因此需要分别对这三种突变和转基因进行鉴定。
针对该品系,尊龙凯时提供了多种基因型鉴定方法,但并非所有方法都需要使用。对于每一个等位基因和转基因,您只需选择一种方法即可完成基因型鉴定。可以查看AlleleSymbol部分注明的等位基因名称,选用合适的鉴定方法。例如,鉴定Hba突变(Hba 关于转基因的鉴定,由于某些品系在构建时尚未通过测序确认转基因整合位点,导致无法基于野生型序列设计引物来区分半合子和纯合子。因此,普通PCR仅能判断小鼠是否携带转基因,若需区分,建议采用qPCR方法,这样更为有效。 此外,您可能注意到在小鼠品系详情页中,还有Pde6b 由于尊龙凯时的大部分品系源自于研究人员的捐赠,除了尊龙凯时提供的基因型鉴定方法外,有时您还可以在相关品系的已发表文献中找到引物信息。尤其是在Cre-lox系统构建的条件性基因敲除研究中,往往缺乏剪切后序列的引物。因此,查看“HOWIT'SUSED”部分中的参考文献会有助于获取更多信息。 对于近交系或杂交系的小鼠而言,由于它们通常不携带特定的突变或转基因,基因型鉴定的难度较大。例如,以000928品系为例,常见的鉴定方法包括生化标记、基因组测序和DNA多态性检测等。然而,比起对每只小鼠进行检测,更推荐您在日常实验中做好种群管理,例如在繁殖过程中严格而详细地记录谱系,以通过科学的种群管理有效避免其他品系或突变的混入,从而减少遗传漂变对实验的影响。