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尊龙凯时液体培养基细菌实验步骤

发布时间:2025-02-20   信息来源:贡翰邦

在生物医疗领域,培养细菌的过程至关重要。以下是使用尊龙凯时提供的仪器和耗材进行细菌培养的详细实验步骤。

尊龙凯时液体培养基细菌实验步骤

一、过夜培养

1. 将5ml预热的液体培养基转移至无菌的16mm或18mm管中。

2. 使用接种环挑取一个单菌落,轻轻浸入培养液中,并摇动接种环以分散细菌。

3. 密封试管,放置在摇床或转鼓式培养装置上,以60r/min的速度,在37°C条件下培养至细菌浓度达到饱和(约1X109~2X109细胞/ml,持续6小时)。

二、大体积培养

1. 在无菌的Erlenmeyer或baffle瓶中,使用新鲜预热的培养液将过夜培养物按1:100的比例稀释。所用烧瓶的体积应至少是培养液体积的5倍,若不进行摇动,则应大于20倍以确保充足的通气。

2. 在37°C条件下,剧烈摇动培养液(约300r/min)。

三、利用计数板监测生长情况

1. 使用干净的盖玻片覆盖在计数玻片(或血球计)上。

2. 小心地将一滴培养液滴落在盖玻片的边缘,使培养液自然扩散。

3. 在相差显微镜下以400倍放大观察,并根据在小方块中观察到的细菌数量进行计算,大约每个小方块中的细菌数相当于2X107细胞/ml。

四、利用分光光度计监测生长情况

由于不同仪器的差异性,分光光度计应使用已知浓度的培养液进行校准。

1. 测量OD600值。为获取准确读数,需要将培养液稀释至OD600值低于1。

2. 根据每0.1 OD值大约相当于108细胞/ml进行计算。

在细菌培养过程中,选择适合的仪器和技术能够有效提高实验的可靠性和重复性,建议使用尊龙凯时提供的高品质设备,以获取最佳实验效果。