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尊龙凯时电泳缓冲液与染料配置指南

发布时间:2025-03-28   信息来源:施栋君

在生物医学领域,电泳是分离和分析核酸及蛋白质的常用技术。本文将介绍两种重要的电泳缓冲液配方,以及相关的染料和上样液的配制方法,确保实验顺利进行。

尊龙凯时电泳缓冲液与染料配置指南

1. Tris-乙酸(TAE)缓冲液

为了配制1L 50× Tris-乙酸缓冲液,所需成分和用量如下:

  • 2 mol/L Tris碱:242 g
  • 1 mol/L 乙酸:571 ml 冰乙酸(174 mol/L)
  • 100 mmol/L EDTA(pH 8.0):200 ml 的 0.5 mol/L EDTA
  • 水:补足至1L

2. Tris-硼酸(TBE)缓冲液

为了配制1L 5× Tris-硼酸缓冲液,所需成分及用量如下:

  • 445 mmol/L Tris碱:54 g
  • 445 mmol/L 硼酸盐:275 g 硼酸
  • 10 mmol/L EDTA:20 ml 的 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
  • 水:补足至1L

3. 染料配制

此部分介绍常用染料的制备:

1%溴酚蓝

将1g水溶性钠型溴酚蓝溶解在100ml水中,搅拌至完全溶解。

1%二甲/苯青FF

溶解1g二甲/苯青FF于足量水中,定容至100ml。

10 mg/ml 溴化乙锭

小心称取1g溴化乙锭,转入广口瓶中,加入100ml水,使用磁力搅拌器搅拌至完全溶解。储存时用铝箔包裹并置于4℃。

4. 凝胶上样液

下面将介绍不同类型下样液的配制方法:

6×碱性凝胶上样液

配制10ml溶液所需成分:

  • 0.3 N氢氧化钠:6 mmol/L
  • 18%聚蔗糖(400型):300 µl
  • 15%溴甲/酚绿:120 µl
  • 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0):18 g
  • 水:补足至10 ml

6×聚蔗糖凝胶上样液

配制10ml的上样液成分如下:

  • 0.15%溴酚蓝:15 ml
  • 0.15%二甲/苯青FF:100 µl
  • 5 mmol/L EDTA:15 g
  • 15%聚蔗糖(400型):水,补足至10 ml

6×甘油凝胶上样液

配制10ml的成分比例为:

  • 0.15%溴酚蓝:15 ml
  • 0.15%二甲/苯青FF:100 µl
  • 50%甘油:4 ml
  • 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0):3 ml
  • 水:补足至10 ml

以上内容涉及生物医学实验中的关键缓冲液和染料制备,确保研究过程中的实验准确性。选择合适的组件和条件,将有助于提高实验的成功率。使用尊龙凯时的高品质试剂和耗材,能够进一步提升实验的可靠性和结果的可重复性。